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锟桔憋拷烯锟斤拷锟斤拷预锟狡斤拷锟斤拷锟斤拷锟斤拷锟斤拷品
服务编号:P02
名称:10%预制胶
规格: 30板/盒
价格: 600 元
Willget预制胶使用说明
(初次使用本产品请仔细阅读本说明)
本预制胶为PH中性缓冲液制备,可长期存放(室温一年,不可冻存)。本品既可进行天然蛋白电泳,也可进行变性蛋白电泳。电泳及转膜缓冲液兼容传统tris-glycine缓冲液,50分钟完成电泳,使用方便,即开即用,蛋白条带条带清晰,并可实现接近100%转膜。目前有胶浓度6%,8%,10%,12%,15%,8%-16%,4%-20%,4%-12%供您选择。本预制胶兼容BIORAD,天能及北京六一的mini胶电泳槽及其他任何胶板宽度在10cm的电泳槽。
预制胶规格
浓缩胶4%,丙烯酰胺与甲叉丙烯酰胺的比例29:1,凝胶厚度1mm,加样孔数,12孔,最大上样量30ul
电泳说明
使用《分子克隆》指定的tris-glycine 电泳缓冲液(tris 25mM,glycine 250mM,SDS 0.1%,),推荐使用恒压150v跑胶50min。客户也可直接购买本公司的电泳转膜通用缓冲液(12元/升)
转膜说明
使用《分子克隆》tris-glycine电转缓冲液(包括湿转及半干转),操作与实验室原有操作相同。(使用本公司电泳转膜通用缓冲液,只需在电泳完成后缓冲液中添加20%乙醇即形成转膜缓冲液,无需甲醇,无需冰浴,湿转半干转条件皆为恒压70v电转50min)
保存方法
置于包装盒中,室温保存一年,整齐叠加平放,或整齐竖直放置。
使用简介
剪开包装取出胶,撕去胶板底端橙色胶纸,将预制胶固定在电泳槽中,内槽加满缓冲液,外槽液面低于内槽液面5mm(或与内槽液面高度一致),将梳子平稳缓慢拔出,电泳后取出胶板,用小螺丝刀沿左右两板间的缝隙将两板别开,掰开两板,用梳子边缘将塑料板底端缝隙中的凝胶顶出。转移凝胶时,将梳子一端插入凝胶下方,并用拇指按住凝胶,进行胶转移。如需切割凝胶,可利用胶板的边缘按压切割凝胶。
注意事项:
1. 电泳及电转缓冲液建议使用新配制的缓冲液,试剂纯度不够,反复使用或长期放置过的缓冲液会降低电泳效果。如果自配的缓冲液不理想,可使用本公司电泳电转通用缓冲液。
2. 电泳前请务必撕去胶板底端的橙色胶纸。
3. 由于新一代预制胶改进了BIORAD的mini胶板两侧上端与硅胶垫接触的凹陷结构,使其兼容所有厂家的mini胶电泳槽。然而,这使得本预制胶对于BIORAD和天能的电泳内外槽存在微小泄露,可通过两种方式解决本问题:一是内槽加满缓冲液,外槽液面加至距内槽液面3-5mm,从而可防止在电泳过程中内槽液面逐步下降。另一种解决方式是将BIORAD的硅胶封闭垫取出后反过来安装,使其没有凸起的平滑面朝外,从而防止漏液。
5. 如果上样缓冲液和电泳缓冲液中含有变性剂和还原剂,利用本预制胶可进行变性蛋白电泳。
6. 如果上样缓冲液和电泳缓冲液中去除变性剂和还原剂,本预制胶可进行天然蛋白电泳,但要注意对于天然的碱性蛋白电泳,需将电源输出线的正负极调换。
问题与解决方案:
本产品为稳定性配方结合自动化装备标准灌制形成,胶的本身质量稳定性很高,其泡沫包装盒也可有效抵抗运输过程产生的冲击,但根据之前客户端反馈,跑胶转膜问题在客户端主要出现在以下几个方面:
首先,内外缓冲液液面没有一样高,内槽缓冲液泄漏后,形成电泳大幅扭曲,电泳时间大幅度延长,这一点可从溴酚蓝扭曲看出。
其次,本预制胶PH为中性,对电泳缓冲液和上样缓冲液的要求相比传统PH8.8的胶要高,缓冲液配制不当,或长期放置变质,都会对本预制胶效果产生影响,如果自己配制的这两个试剂与本产品附送的缓冲液相比,条带较模糊,请重新按本说明书或《分子克隆》指定配方重新配制,也可直接购买文渊阁这两个稳定型试剂。有两个参数需要注意,一个是电压150v电泳时,每板胶的电流30mA-55mA之间,随着时间电流逐步会降低,湿转70v时,电流大致在200Ma-300mA,随着时间电流是逐步升高,如果您的电流远不在这一范围,需检查缓冲液的质量和内外槽电泳液液面是否一样平。
最后,在上样时不可将枪头过度插入上样孔中,枪头的过度插入会导致胶板形变,形成腔隙造成样品向下泄露。另外,在把凝胶从板上取出时,最好用梳子边缘将胶从板侧缝隙中顶出,再将梳子从胶下插入,用拇指按住胶,进行转移。这些操作是为了保证取胶时不形成胶上裂缝。
关联产品(可试用):
产品名称
功能及特点
超灵敏western服务 利用以上试剂结合自动化设备实现高灵敏标准化western服务,200元一张膜,24h内出结果
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